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茶树农杆菌转化系统和基因枪转化系统的优化
2021-02-23 12:08:32热度:199°C
在用农杆菌浸染前，将
茶树外植体预培养在含有PVP(po1yvinylpyrro1idone，16g/L)的预培养基上2-3d可提高转化频率。优化后的茶树基因枪转化体系，即制弹程序：60mg／1m1钨粉悬浮液10μ1中加入1．6μ1质粒DNA(1μg／μ1)，再分别加入0．1mol/L的亚精胺4μ1，2．5mol/L的CaCl2l5μ1，最后定容至48μ1；每次轰击上样量为8—10μ1。基因枪转化后抗性筛选2个月，抗性愈伤组织存活率为5．0％—12．1％。
完成机构：浙江大学茶叶研究所，浙江杭州310029
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