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茶多酚对D-半乳糖与Aβ25～35诱导脑神经细胞凋亡的保护效应

背景：有研究表明茶多酚对β淀粉样蛋白、6-羟多巴和氧化性物质诱致海马神经细胞的神经毒性具有保护作用,临床初试表明其对老年性痴呆高危人群认知功能减退具有一定的防治作用,但其作用靶点及作用机制仍是研究的热点。目的：观察茶多酚干预D-半乳糖与Aβ25～35诱致小鼠脑神经细胞凋亡作用。设计：随机对照动物实验。单位：暨南大学药学院药理教研室。材料：实验于2004-09/2005-01在暨南大学医学实验中心完成。选用90只2月龄健康昆明种小鼠,雌雄各半,体质量26～28g,由广东省医学实验动物中心提供。茶多酚（浙江东方茶业科技公司,批号：20040203）;D-半乳糖（上海试剂二厂,批号：20030708）;Aβ25～35（Sigma,批号：13/01/2004）;维生素E（上海信谊药厂,批号：20030708）。方法：实验干预：按体质量将小鼠随机分为6组：假手术组（n=17）,模型组（n=16）,维生素E组（n=16）,茶多酚低剂量组（n=13）,茶多酚中剂量组（n=14）、茶多酚高剂量组（n=14）。除假手术组外,小鼠均皮下注射D-半乳糖,120mg/（kg·d）,连续给药至第12周,并在第7周时,于侧脑室缓慢注射4nmolAβ25～35。假手术组小鼠侧脑室内注射等容积的人工脑脊液。各组药物处理于造模后第1周开始,假手术组和模型组给予蒸馏水,维生素E组给予100mg/kg维生素E,茶多酚低、中、高剂量组分别给予100,250,625mg/kg,给药方式均为灌胃,容量均为10mL/kg,连续给药12周。实验评估：给药后各组分别采用LW-Ⅱ型水迷宫仪测定小鼠学习记忆情况;分别取动物脑、肝脏组织和血清测定超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量;Fura-2/AM负载法测定小鼠红细胞内和脑神经元细胞浆钙离子浓度;流式细胞仪检测各组小鼠脑神经细胞凋亡。主要观察指标：①小鼠学习记忆情况。②血清、肝脏和脑组织内超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量。③各组红细胞内和脑神经元细胞浆内钙离子水平变化。④小鼠脑神经细胞凋亡情况。结果：纳入大鼠90只均进入结果分析。①药物处理12周后,茶多酚中、高剂量组和维生素E组的小鼠游出迷宫时间短于模型组,进入迷宫盲端的错误次数较模型组减少,差异均有统计学意义（P〈0.05～0.01）。②茶多酚中、高剂量组超氧化物歧化酶活性较模型组有所增高,茶多酚高剂量组丙二醛含量较模型组有所降低,差异有统计学意义（P〈0.05～0.01）。③茶多酚中、高剂量组和维生素E组红细胞内和脑神经元细胞浆钙离子浓度均低于模型组,差异有统计学意义（P〈0.05～0.01）。④茶多酚各剂量组神经细胞凋亡率均低于模型组,差异有显著性意义（P〈0.05）。结论：茶多酚具有抑制D-半乳糖与Aβ25～35诱致脑神经细胞凋亡作用,并明显改善摸型小鼠学习记忆能力,其作用可能与提高全身性抗氧化能力,改善氧化应激损伤引起的细胞内钙超载有关。

完成机构：[1]北华大学医学院生理学教研室,吉林省吉林市132013 [2]暨南大学药学院药理教研室,广东省广州市510632

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