悦康外感凉茶的薄层鉴别研究.pdf

悦康外感凉茶由三叉苦、连翘、岗梅、板蓝根、大青叶、水翁花、滑石、芦根、木患根等12味中药材组成，为广州中医药大学附属中山中医院常用制剂。本制剂具有疏风解表、清热解毒的功效。用于外感风热感冒，发热头痛，咽喉肿痛，上呼吸道炎，扁桃体炎。为控制该制剂产品质量，笔者对其进行了系统的薄层色谱鉴别研究，建立了三叉苦、岗梅、连翘、大青叶和板蓝根薄层色谱鉴别方法，为该制剂的质量控制提供了依据。

1、仪器与试药

1.1仪器

医用超声波清洗器：KQ3200E（昆山市超声仪器有限公司）；薄层色谱摄影仪：Goodsee-I（上海科哲生化科技有限公司）；电子天平：JA1203（上海天平仪器厂）；电热恒温水浴锅：（上海衡平仪器仪表厂）；硅胶G薄层板：（青岛海洋化工厂分厂）。

1.2试药

岗梅：中国药品生物制品鉴定所，批号1152-200001；连翘：中国药品生物制品鉴定所，批号908-9105；芦丁：中国药品生物制品鉴定所，批号0080-9705；大青叶：中国药品生物制品鉴定所，批号747-200005；板蓝根：中国药品生物制品鉴定所，批号971-200002；靛玉红：中国药品生物制品鉴定所，批号717-200204；三氯甲烷、甲醇、氨水、醋酸乙酯、环己烷、乙醚、丙酮、乙醇、硫酸、三氯化铝均为分析纯；悦康外感凉茶由本院制剂室提供；三叉苦由本院中药房提供，经本院梅全喜教授鉴定，符合《广东省中药材标准》（第一册）规定。

2、方法与结果

2.1处方与工艺本处方由三叉苦、连翘、岗梅、板蓝根、大青叶、水翁花、滑石、芦根、木患根等12味中药材组成，方中岗梅、板蓝根、木患根、三叉苦、连翘、滑石、芦根采用水煎煮3次，水提取液浓缩至一定量的浓缩液；其余药材洗净，凉干，粉碎备用。将粉碎得到的药粉与浓缩液置于混合机的物料斗中，按照混合机的操作方法进行混合。将混合得到的湿混合物，置于干燥箱中60℃干燥。将干燥后的中药粉过筛后置于包装机料斗中，用热封茶叶滤纸包成茶叶包，即得。

2.2三叉苦的鉴别

取样品内容物2g，用70％乙醇2OarL回流提取30min，滤过，滤液水浴挥干，残渣用三氯甲烷1mL溶解，作为供试品溶液。另取缺三叉苦药材的其余各药制成的阴性对照品2g，按供试品溶液制备方法制得三叉苦阴性对照溶液。再取三叉苦对照药材5g，同供试品溶液制备方法，制得对照药材溶液。另取缺岗梅药材的其余各药制成的阴性对照品5g，按供试品溶液方法制得阴性对照溶液。照薄层色谱法（《中国药典》一部附录ⅥB）试验，吸取上述供试品溶液、阴性对照溶液、对照药材溶液各10trL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷一乙酸乙酯一（8：2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％铝酸钠一浓硫酸溶液，于105~C加热0.5h。供试品色谱中，在与对照药材色谱相对应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照色谱无垦此斑点。见图1。

2.3岗梅的鉴别

取本品5g，加氨水20mL浸泡30arin，2247加三氯甲烷50mL超声提取30min，滤过，滤液置分液漏斗--中，弃去氨水层，三氯甲烷层蒸干，加环己烷1mL溶解，作为供试品液。另取岗梅对照药材2g，同法制成对照药材溶液。另取缺岗梅药材的其余各药制成的阴性对照品5g，按供试品溶液方法制得阴性对照溶液。照薄层色谱法（中国药典一部附录ⅥB）试验，分别吸取上述3种溶液各5，分别点于同一以0.4％NaOH溶液制备的硅胶G薄层板上，以环己烷一醋酸乙酯（5：1）为展开剂，展开，取出，置于紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照色谱无此荧光斑点。见图2。

图1三叉苦TLC图

图2岗梅TLC

图3连翘TLC

图4大青叶板蓝根TLC

2.4连翘的鉴别

取样品内容物2g，加乙醚30mL于索氏提取器中回流1h，分离乙醚液，挥干乙醚，残渣加甲醇20mL回流30arin，分取甲醇液，蒸干，残渣加甲醇至2mL，作为供试品溶液。取缺连翘药材的其余各药制成的阴性对照品2g，按供试品溶液方法制得连翘阴性对照溶液。另取连翘对照药材2g，加甲醇10mL，超声处理20arin，滤过，滤液浓缩至2mL，作为对照药材溶液。再取芦丁对照品加甲醇制成每lmL含2arg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典一部附录ⅥB）试验，分别吸取上述4种溶液各lOlL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯一甲酸一水（8：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干至无酸味，喷以三氯化铝乙醇液，挥干乙醇后于紫外光灯（365nm）下观察。供试品色谱中，在与对照药材色谱、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照色谱无此荧光斑点。见图3。

2.5大青叶板蓝根的鉴别

取样品内容物2g，加三氯甲烷20mL，加热回流1h，滤过，滤液浓缩至1mL，作为供试品医溶液。取缺大青叶、板蓝根药材的其余各药制成的阴性对约照品2g，按供试品溶液方法制得阴性对照溶液。另取大青2248叶、板蓝根对照药材各2g，加三氯甲烷10mL超声处理--20arin，滤过，滤液浓缩至lmL，作为对照药材溶液。再取靛妻玉红对照品加三氯甲烷制成每lmL含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典一部附录ⅥB）试验，分别吸取上述4种溶液各10txL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯一三氯甲烷一丙酮（5：4：1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上 ，显相同颜色的斑点，阴性对照色谱无此斑点。见图4。

3讨论

本制剂是由12味中药组成的复方制剂，成分较为复杂，薄层鉴别过程中对提取方法及展开剂的选择有较高要求。笔者所采用的实验方法经多次试验，结果稳定，且方法简便易行，斑点分离清晰，阴性对照无干扰，可作为悦康外感凉茶质量控制的方法。三叉苦虽在《广东省中药材标准》…中有记载，但无该药材的薄层色谱鉴别方法，只在一些期刊文献中有其薄层色谱鉴别方法的报道，但应用在该制剂薄层鉴别试验中均效果不理想，后采用本文方法取得较好效果。在岗梅的薄层色谱条件试验过程中，原本参照《广东省中药材标准》中的岗梅薄层鉴别方法，但以此法试验所得的色谱图斑点分离不理想，且阴性干扰大。后经对其提取方法及展开剂多次实验摸索，结果采用本文方法，取得斑点分离清晰，阴性对照无干扰的效果，故将其列人岗梅薄层色谱鉴别条件。连翘的薄层色谱鉴别方法则有别于《中国药典》中的连翘薄层鉴别项下方法，本方法采用芦丁作为对照品做薄层色谱试验，结果重现性好，方法比《中国药典》中采用连翘苷作为对照品做薄层色谱试验简便的多，且斑点分离清晰，阴性对照无干扰，故采用本文方法作为该制剂中连翘的薄层色谱鉴别方法；而大青叶、板蓝根的薄层鉴别则都是采用《中国药典》中的大青叶、板蓝根薄层鉴别项下方法，结果取得良好效果。