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茶碱、咯利普兰和acetamide—45对GL62酵母细胞表达的人磷酸二酯酶4A的抑制作用
2021-02-22 16:20:52热度:190°C
目的：研究GL62酵母细胞中磷酸二酯酶4A（PDE4A）的诱导表达和
茶碱、咯利普兰、N－对氟苄基－3－[(N-4-吡啶）－乙酰胺]-吲哚45（acetamide-45)对GL62酶母细胞诱导提取物中PDE4A活性的抑制作用。方法：克隆了人PDE4A基因的GL62酵母细胞在CuSO4 150μmol/L条件下诱导表达PDE4A并提取，用高效液相色谱法测定PDE4A的活性。结果：GL62酵母细胞在CuSO4诱导下的表达产物蛋白分子在62kDa和83kDa之间，表达产物的PDE4A的活性在3h达到最大为（188±23）μmol·g^-1·min^-1，其米氏常数Km为（17．7±2．6）μmol·L^-1.茶碱，咯利普兰和acetamide-45对诱导提取物PDE4A活性的IC50（95％可信限）分别为1642（989－2727），4．58（3．45－6．08）和275（170－444）μmol·L^-1。结论：GL62酵母细胞经CuSO4诱导可表达PDE4A，茶碱、咯利普兰和acetamide-45能抑制其活性，GL62酵母细胞的诱导表达提取物可用来研究PDE4A及其抑制剂。
完成机构：浙江大学医学院国家药品监督管理局呼吸药物研究实验室，杭州310031，中国
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