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恶臭假单胞菌ND6菌株catA基因的克隆和表达及其儿茶酚裂解途径探讨
2021-02-22 12:12:58热度:136°C
恶臭假单胞菌ND6菌株的萘降解质粒pND6-1中编码儿
茶酚1,2-双加氧酶的catA基因在大肠杆菌中进行了克隆和表达,并研究表达产物的酶学性质.结果表明：酶的Km为0.019μmol/L,Vmax为1.434μmol/（min·mg）;具有很好的耐热性,在50℃保温45min后仍能够保留酶活力的93.7%;Fe^2＋对酶活性有显著的促进作用,其比活力是对照反应的292%;酶对4-氯儿茶酚的催化活性非常低,属于I型儿茶酚1,2-双加氧酶.以萘为底物生长时,ND6菌株的细胞提取液中既存在催化邻位裂解途径的儿茶酚1,2-双加氧酶活性,也存在催化间位裂解途径的儿茶酚2,3-双加氧酶活性.以苯甲酸、对羟基苯甲酸和苯乙酸为唯一碳源生长时,ND6菌株细胞提取液的儿茶酚1,2-双加氧酶活性远远大于儿茶酚2,3-双加氧酶活性.表明ND6菌株既能通过儿茶酚间位裂解途径降解萘,也能通过儿茶酚邻位裂解途径降解萘,而以苯甲酸、对羟基苯甲酸和苯乙酸为诱导物时只利用儿茶酚邻位裂解途径.
完成机构：[1]南开大学生命科学学院,天津300071 [2]南开大学环境科学与工程学院,天津300071 [3]南开大学生物活性材料教育部重点实验室,天津300071
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