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茶树亲环素基因cDNA全长的分析鉴定与原核表达
2021-02-22 12:06:00热度:109°C
通过对
茶树新梢cDNA文库大量随机测序，获得了一个编码亲环素的全长基因，在GenBank登录，登录号为DQ904327。茶树亲环素基因cDNA全长949bp，其中开放阅读框全长495bp，编码蛋白质含有164个氨基酸，分子量约为17．47kD，等电点约为8．54，它具备5’端非编码区的“CAAT”标志及3’端非编码区的“AATAAA”poly-A加尾信号。其推测的氨基酸序列经与26条其他生物亲环素蛋白氨基酸序列进行CLUSTAL W多序列联配并以Neighbor-Joining法进行进化树构建后，发现与水稻和小麦的相似性较高，达到85％以上。根据亲环素基因开放阅读框序列设计引物，构建了原核表达载体pET／Csin-Cyp，并在大肠杆菌BL21（DE3）中成功诱导出了一个分子量为23kD的亲环素融合蛋白。
完成机构：[1]中国农业科学院茶叶研究所茶树资源和遗传改良与分子生物学实验室,浙江杭州310008 [2]中国农业科学院研究生院,北京100081
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