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茶树α-tubulin基因的原核表达及其多克隆抗体的制备
2021-02-21 09:57:17热度:225°C
根据
茶树α-微管蛋白（α-tubulin）的mRNA全长序列（GenBank登录号DQ340766）设计引物，以RT-PCR方法扩增茶树α-tubulin基因，将扩增产物克隆到原核表达载体pET-32a（＋）上，并转化至大肠杆菌BL21trxB（DE3）中，经异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导后以包涵体形式表达。以纯化后的α-tubulin融合蛋白制备兔多克隆抗体，用Westernblot方法检测抗体特异性。结果显示α-tubulin蛋白以包涵体形式大量表达，以融合蛋白制备的抗体对茶树体内的α-tubulin具有良好的特异性。
完成机构：安徽农业大学茶叶生物化学与生物技术教育部重点实验室,安徽合肥230036
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