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以神经内肽酶为靶点筛选治疗阿尔茨海默症天然药物的实验研究

2021-02-20 17:24:34热度:168°C

目的筛选具有提高神经内肽酶(NEP)活性从而降低神经细胞β-淀粉样肽(Aβ)水平的药物,为临床治疗阿尔茨海默症(AD)提供实验依据。方法以脂质体LipofectamineTM2000介导瑞典突变型淀粉样肽前体蛋白(sweAPP)表达质粒pcDNA3.1-sweAPP转染神经母细胞瘤细胞SK-N-SH,G418筛选获得稳定表达细胞株作为AD模型细胞,采用蛋白印迹技术检测sweAPP表达情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养基中A4β0和A4β2含量变化,进而以MTT法检测各天然药物对SK-N-SH细胞增殖能力的影响,确定药物的有效浓度及最佳作用时间,以NEP肽酶实验检测药物对NEP酶活性影响,ELISA法检测药物对Aβ水平的影响。结果Western Blot结果显示,转染后SK-N-SH细胞高表达sweAPP蛋白;ELISA结果显示,转染后的SK-N-SH细胞分泌A4β0、A4β2明显升高,分别为转染前的7.26和3.27倍(P<0.05)。NEP肽酶实验检测结果显示,茶多酚、人参皂苷Rb1、Rg3能够明显提高NEP酶活性,分别为(117±2.8)%(、131±4.0)%和(121±1.6)%。ELI...

完成机构：山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所山东大学附属济南市中心医院

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