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茶树巯基蛋白酶抑制剂基因的cDNA克隆与序列分析

2021-02-24 16:21:16热度:150°C

对多种已知植物巯基蛋白酶抑制剂（cystatin）基因的氨基酸序列进行比对分析，根据其高度保守的氨基酸序列设计一对简并引物，并从茶树品种龙井43鲜叶中提取总RNA，用RT-PCR法扩增出一204bp的cDNA特异片段，然后通过3’／5’RACE的方法，分别扩增出3’端和5’端的序列，从而获得茶树巯基蛋白酶抑制剂基因的cDNA全长序列，所得序列全长627bp，编码101个氨基酸，分子量约11．062KDa。该基因在推测的氨基酸序列中含有巯基蛋白酶抑制剂家族中高度保守的、与其活性有关的QXVXG结构，且经Blast分析表明，该基因序列与其他植物巯基蛋白酶抑制剂基因的氨基酸序列同源性为54％～77％。

完成机构：[1]安徽农业大学农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室,安徽合肥230062 [2]安徽教育学院生物系,安徽合肥230061 [3]西北农林科技大学茶叶研究所,陕西杨陵712100

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