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茶树β-1，3葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的优化表达
2021-02-24 13:37:55热度:219°C
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茶树中获得β-1，3葡聚糖酶（β-1，3-glucanase，β-1，3-glu）基因cDNA，发现其中存在着一些序列，它们与核糖体竞争性地结合pET32a载体上的RBS位点，造成该基因cDNA在原核生物中很难表达。作者对其中的两处基因序列进行了突变，通过设计PCR引物，利用密码子的简并性，保证了突变后蛋白质的一级结构不变。使葡聚糖酶基因在大肠杆菌中明显表达。通过SDS-PAGE分析，证明表达产物分子量约75．8kD，与预计大小一致，并通过水杨酸法对其进行酶活测定，证明其有活性。
完成机构：[1]安徽农业大学农业部茶叶生物化学与生物技术重点实验室,合肥230036 [2]安徽农业大学生命科学学院,合肥230036
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