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日本蟳酚氧化酶的分离纯化及其部分生物化学性质研究
2021-02-23 21:14:37热度:162°C
利用离子交换层析和凝胶过滤层析等方法，从日本好（Charybdis japonica）血淋巴中分离纯化出了酚氧化酶，并以L-二羟苯丙氨酸（L—DOPA）作为特异性底物对其生化性质和酶性质进行了研究。结果表明，酚氧化酶和酚氧化酶原的分子质量分别为64．5ku和69．5ku。以L—DOPA为底物对酚氧化酶纯品进行研究发现，其最适pH值为6．0、最适温度为40℃。对底物L—DOPA和儿
茶酚的米氏常数Km值分别为3．41和7．97mmol／L。该酶对亚硫酸钠、苯硫脲极为敏感，对硫脲、苯甲酸非常敏感，表明该酶很可能是一种儿茶酚酶型的酶。此外，EDTA，DETC，Zn^2＋，Mg^2＋和Cu^2＋均能显著抑制该酶活性，且10mmol／L Cu^2＋能有效地回复该酶被DETC所抑制的酶活性，表明该酶确为一种Cu-金属酶。
完成机构：中国海洋大学生命科学与技术学部海洋生物系,山东青岛266003
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