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茶尺蠖小RNA病毒5’端非编码区的克隆和测序及与哺乳动物小RNA病毒的比较分析

2021-02-23 20:56:13热度:99°C

用Trizol从纯化的尺蠖Ectropis oblique小RNA病毒(EoPV)中提取病毒基因组RNA,逆转录后加poly(dT),然后进行两步PCR扩增基因组5’端。克隆测序后,对其5’端非编码区的核苷酸序列进行分析,发现具有哺乳动物小RNA病毒的5’端非编码区的一些特征:A/T含量丰富、起始密码子上游AUG和小顺反子多。利用mfold预测了EoPV5’端非编码区的二级结构,存在4个茎环结构,有哺乳动物内部核糖体进入位点(IRES)的保守区域,即含保守基序GNRA的茎环A和A/C丰富的环B及多聚嘧啶区域。据此推测EoPV基因组翻译采用IRES起始机制。

完成机构:武汉大学生命科学学院,武汉430072

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