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微囊牛肾上腺髓质细胞的冻存及其活性评价

2021-02-23 12:33:11热度:129°C

目的 建立一种微囊牛肾上腺髓质细胞(bovine chromaffin cell,BCC)的冻存方法,为临床推广微囊人工生物细胞技术移植异种细胞奠定基础。方法 微囊化牛肾上腺髓质细胞冻存以二甲基亚砜为保护剂,循序缓慢降温(4℃,1h,-20℃ 2h,-50℃过夜,液氮),复苏时迅速将冻存管放入37℃水浴中。通过检测其基础儿酚胺分泌量和在高钾(58mmol/L)、乙酰胆碱(10^-4mol/L)刺激下的分泌量来观察其功能活性。结果 冻存复苏后微囊BCC保留了儿茶酚胺的分泌功能,基础与刺激分泌量分别为(3.207±0.350)ng/ml和(12.496±2.302)ng/m1,大约为冻存前微囊牛肾上腺髓质细胞分泌量的80%;同时刺激后儿茶酚胺分泌增加(P<0.01)。结论 建立一种微囊牛肾上腺髓质细胞的冻存方法,通过功能检测证明该方法是有效和成功的。

完成机构:卫生部人工细胞工程技术研究中心,天津300170

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