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维甲酸和茶多酚对结肠癌细胞微卫星序列不稳定的抑制作用
2021-02-22 16:33:21热度:210°C
目的 以复制错误（replication error,RER^+)表型的人结肠癌细胞株RKO作为靶细胞，研究全反式维甲酸（all-trans-retinoic acid,ATRA)和
茶多酚（polyphenon,PP)对肿瘤细胞微卫星序列（microsatellite sequence,MS)突变的影响，并观察肿瘤细胞内碱基错误误配对修复（mismatch repair,MMR)基因hMLH1和hMSH2的表达情况。方法 将含有外源性MS（CA）14的穿梭质粒pCMV-CAR转染RER^+人结肠癌细胞株RKO。外源性的（CA）14的突变可使质粒标记基因Lac Z恢复正常读码，表达产生β－半乳糖苷酶，后者使X－gal变蓝。全反式维甲酸和茶多酚对MS的影响可直接通过X－gal染色结果判断。利用逆转录－聚合酶链反应方法，检测经全反式维甲酸和茶多酚处理的RKO细胞中碱基错误配对修复基因hMLH1和hMSH2的表达情况。结果 全反式维甲酸1μmol/L、0．1μmol/L，茶多酚3μg/ml，对RKO细胞的增殖无明显的影响。作用1周后，均显示对外源性（CA）14的突变有明显的抑制效应。但不能诱导hMLH1和hMSH2表达。结论 全反式维甲酸和茶多酚能抑制RER^+细胞中外源性（CA）14重复序列突变，提示两者对人癌细胞MS遗传不稳定有保护作用。其作用机理可能不是通过影响hMLH1和hMSH2的表达而起作用。
完成机构：[1]南京医科大学应用毒理研究所210029 [2]第一附属医院
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